人鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重组蛋白适用于神经酰胺合成体外酶学分析、鞘磷脂水解活性测定、骨发育相关信号通路与细胞凋亡机制探究实验。
型号:YS-DB2630
产品名称:人鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 3 (SMPD3)
NSMASE2; Neutral Sphingomyelinase II
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:29.9kDa
实际分子量:30kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Asp417~Gly651 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:4.8
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

底物水解反应机制:SMPD3 水解鞘磷脂磷酸二酯键,裂解生成神经酰胺与磷酸胆碱,以底物消耗量或产物生成量作为活性判定依据。
荧光底物分光检测:使用荧光标记鞘磷脂模拟底物,酶切后释放游离荧光基团,荧光强度与酶活性线性正相关,实现微量活性定量。
抗体免疫印迹验证:特异性 SMPD3 抗体结合重组目的蛋白,条带分子量匹配理论值,证明蛋白翻译、折叠、表达无误。
空白对照扣除校正:设置无酶空白、灭活酶对照组,扣除自发水解背景值,消除缓冲液、杂质酶对活性检测结果的干扰。
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使用操作指南:

复溶操作
原核表达冻干粉:用无菌超纯水或指定缓冲液复溶,100μg蛋白加入86μL溶剂,轻轻摇晃或用移液枪轻吹溶解,禁止涡旋振荡。
真核表达溶液态:直接取用,如需稀释需使用匹配的缓冲液,避免剧烈操作。
储存条件
未复溶冻干粉:-20℃或-80℃保存,避免反复冻融,有效期通常为1-2年。
复溶后溶液:分装成单次使用量,-20℃或-80℃保存,避免多次冻融,有效期建议为1-3个月。
常见问题处理
标签影响功能:若用于蛋白功能或药物研究,优先选择无标签蛋白,或与去标签版本做对照实验。
批间差异:使用前核对CoA(分析证书),必要时进行批次间活性、纯度对比验证。
内毒素干扰:细胞实验前采用内毒素去除试剂盒处理,或直接选择低内毒素级别的产品。
关键字: 人鞘磷脂磷酸二酯酶3;SMPD3;重组蛋白;
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