人溶血卵磷脂酰基转移酶4(LPCAT4)重组蛋白用于膜磷脂重构酶活性分析、脂代谢紊乱、炎症因子分泌调控及上皮细胞功能体外机制探究实验。
型号:YS-DB2034
产品名称:人溶血卵磷脂酰基转移酶4(LPCAT4)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 4 (LPCAT4)
AYTL3; AGPAT7; LPAAT; LPEAT2; Lysophosphatidylethanolamine Acyltransferase 2; Acyltransferase Like 3; 1-Acylglycerol-3-Phosphate O-Acyltransferase 7; Plasmalogen synthase
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

酰基转移酶促反应机制:催化脂酰 CoA 的酰基基团转移至溶血卵磷脂,合成二酰基卵磷脂,以此判定酶活性。
荧光标记磷脂产物检测:荧光修饰底物经酶促反应生成荧光产物,荧光强度与 LPCAT4 活性线性相关。
WB 特异性身份鉴定:LPCAT4 抗体杂交验证重组蛋白分子量、表达完整性。
双底物依赖验证:同时缺失溶血卵磷脂或脂酰 CoA 任一底物,反应无法进行,证明催化特异性。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 人溶血卵磷脂酰基转移酶4;LPCAT4;重组蛋白;
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