竞争 ELISA 检测原理,酶标板包被 C 肽抗原,样本大鼠 C 肽与固相抗原竞争结合酶标记特异性抗体,孵育洗板后底物显色,吸光度随样本 C 肽浓度升高下降,用于胰岛分泌功能定量检测。
产品参数:
产品名称 | 大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1624 |
英文名称 | Rat C-Peptide ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测灵敏度0.05ng/mL,可精准检测大鼠微量C肽含量
检测范围:0.1ng/mL - 50ng/mL,适配大鼠血糖、胰岛功能相关样本检测
反应时间:总实验时长120分钟,样本孵育60分钟,酶孵育30分钟,显色15分钟,终止5分钟
保存条件:2 - 8℃避光冷藏保存,冻干标准品-20℃保存,复溶后冷藏
有效期:未开封有效期6个月,复溶标准品7天内用完
显色系统:高灵敏TMB显色系统,低浓度样本显色辨识度高
检测波长:450nm检测,570nm校正
标准曲线绘制:7点梯度标准浓度,四参数拟合,R²≥0.996
特异性:特异性结合大鼠C肽,与胰岛素、胰高血糖素无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,数据精准稳定
注意事项:血浆样本需空腹采集,避免饮食干扰;样本避免反复冻融;洗涤步骤充分,去除非特异性结合杂质
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂平衡:全套试剂室温平衡 23min,20 倍浓缩洗涤液稀释,血浆样本无脂血。
标准品稀释:C 肽冻干标准品复溶梯度稀释 6 浓度,空白孔对照。
加样孵育:50μL 标准品 / 样本 + 50μL HRP 酶抗体,封膜 37℃避光孵育 59min。
洗板操作:洗涤液浸泡 30s,拍干残液,洗板 5 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 14min。
终止读数:终止液混匀,8min 内检测 OD450。
数据计算:曲线定量 C 肽,评估胰岛 β 细胞胰岛素分泌功能。
关键字: 大鼠C肽;C-Peptide;ELISA试剂盒;
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