双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板预包被抗 L-LDH 捕获抗体,样本 L 型乳酸脱氢酶结合固相载体,酶标检测抗体结合靶蛋白,洗涤显色后 OD 值与 L-LDH 含量正相关,定量细胞损伤指标。
产品参数:
产品名称 | 大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1061 |
英文名称 | L-LDH ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.1U/L,可精准检测大鼠微量L-LDH酶活性
检测范围:0.2U/L - 160U/L,覆盖大鼠组织损伤、代谢紊乱样本浓度区间
反应时间:总反应时长125分钟,样本孵育65分钟,酶孵育30分钟,显色15分钟,终止5分钟
保存条件:2 - 8℃避光冷藏保存,酶类试剂禁止冷冻,防止蛋白变性失活
有效期:原装试剂盒有效期6个月,合规储存可稳定保质
显色系统:适配乳酸脱氢酶检测的专用TMB显色体系,显色响应灵敏
检测波长:450nm主波长检测,630nm校正背景误差
标准曲线绘制:6点梯度标准浓度,四参数曲线拟合,R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠L-LDH,与D-LDH及其他脱氢酶无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%,实验重复性良好
注意事项:严禁使用溶血样本,溶血会导致LDH假性升高;样本低温制备、及时检测;所有试剂回温至室温后再进行实验操作
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂室温静置 26min,浓缩洗涤液稀释 20 倍,细胞培养上清混匀。
标准品稀释:L-LDH 标准品稀释配制 6 梯度标准液,空白调零孔。
加样孵育:各孔 50μL 标准品、样本,酶结合物 50μL,37℃避光孵育 61min。
洗板操作:洗涤液浸泡 32s,拍干,洗板 5 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 15min。
终止读数:终止液混匀,9min 内读取 450nm 吸光值。
数据计算:标准曲线定量 L-LDH,评估细胞坏死损伤程度。
关键字: 大鼠L-鼠乳酸脱氢酶;L-LDH;ELISA试剂盒;
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