双抗体夹心 ELISA 法，微孔板固定抗大鼠 Smad1 特异性捕获抗体，样本中 Smad1 蛋白与包被抗体结合，洗板去除未结合杂质，加入酶标记抗 Smad1 检测抗体形成夹心复合物，底物显色后测定吸光度，结合标准曲线定量样本 Smad1 蛋白水平。
产品参数：
产品名称 | 大鼠Smad1 ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1165 |
英文名称 | Smad1 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度：最低检测灵敏度≤2.0pg/mL
检测范围：5pg/mL - 1200pg/mL
反应时间：总反应时长180分钟（样本温育90分钟+二抗温育30分钟+显色30分钟）
保存条件：试剂盒2-8℃避光冷藏，抗体组分单独密封，防潮避光
有效期：未拆封原装12个月
显色系统：HRP催化TMB显色体系，硫酸终止液终止
检测波长：450nm（主波长），630nm（参比波长）
标准曲线绘制：梯度稀释标准品，检测OD均值，四参数拟合标准曲线，定量样本Smad1含量
特异性：特异性识别大鼠Smad1蛋白，与Smad2、Smad3、Smad5无交叉反应
重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%
注意事项：细胞、组织样本需充分裂解，去除杂质；实验全程避免非特异性吸附，洗板彻底；试剂现用现取，避免长时间室温放置失活。
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程：
试剂平衡：试剂盒室温复温 20min，洗涤液稀释，酶结合物混匀无沉淀后使用。
标准品稀释：Smad1 冻干标准品溶解梯度稀释，设置空白零浓度孔。
上样：标准孔 50μL 标准品，细胞裂解液样本 50μL 加入检测孔。
酶标抗体孵育：每孔添加 50μL HRP-Smad1 抗体，封膜 37℃避光孵育 63min。
洗板：洗涤液浸泡 33s，拍干，洗板 5 次。
显色：TMB 底物各 50μL，避光 37℃孵育 17min。
终止检测：终止液混匀，8min 内 450nm 读数，计算 Smad1 表达量。
关键字： 大鼠;Smad1;ELISA试剂盒;
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