本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔固定纯化的大鼠CETP特异性捕获抗体,加入梯度标准品和待测大鼠样本,样本中的CETP抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除非特异性结合成分,加入辣根过氧化物酶标记的CETP检测抗体,形成稳定的夹心免疫复合物,经洗涤后进行底物显色反应,显色深浅与样本CETP含量正相关,终止显色后检测OD值,对照标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
英文名称:CETP ELISA Kit
货号:Y-E1267
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤1.0ng/mL
检测范围:2.0ng/mL - 60ng/mL
反应时间:总反应时长90分钟(抗原结合60分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光密封保存,禁止冷冻蛋白抗体组分
有效期:未开封12个月,开封后1个月内有效
显色系统:TMB高灵敏度显色体系,适配转运蛋白低浓度检测
检测波长:450nm/630nm双波长检测
标准曲线绘制:四参数Logistic拟合标准曲线,梯度浓度覆盖全检测区间
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
特异性:特异性结合大鼠CETP,与血脂相关转运蛋白无交叉反应
注意事项:血清样本需澄清,脂血样本会遮挡反应、影响结果;实验温度需恒定37℃,保证结合稳定性。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 35min,洗涤缓冲液 1:26 稀释,大鼠血浆样本离心去除脂蛋白沉淀。
各微孔添加 100μL 梯度 CETP 标准品、待测血浆、空白稀释液。
一步法酶结合液 200μL 每孔,避光 37℃孵育 72min。
洗涤液浸泡 42s,洗涤 5 次,垂直拍干微孔。
单一显色液 100μL 避光孵育 19min。
硫酸终止液中和显色,震荡混匀。
酶标仪测 OD450,定量 CETP 蛋白表达量。
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关键字: 大鼠胆固醇酯转移蛋白;CETP;ELISA试剂盒;
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