大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板包被纯化的大鼠M-AChR特异性捕获抗体，加入标准品和待测大鼠神经组织样本，样本中的M-AChR抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除非特异性杂质，加入辣根过氧化物酶标记的M-AChR检测抗体，形成稳定免疫复合物，洗涤后进行底物显色，终止后检测吸光度值，对照标准曲线定量检测样本中M-AChR的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒

英文名称：M-AChR ELISA Kit
货号：Y-E1114

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.6ng/mL

检测范围：1.2ng/mL - 48ng/mL

反应时间：总反应时长105分钟（受体结合75分钟、显色30分钟）

保存条件：2-8℃避光密封保存，受体蛋白试剂严禁冷冻

有效期：原装试剂盒12个月，开封后1个月内有效

显色系统：神经受体专属高灵敏度TMB显色体系

检测波长：450nm/630nm双波长校正

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，覆盖受体全浓度检测区间

特异性：特异性结合大鼠M-AChR，与烟碱型乙酰胆碱受体无交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：神经组织样本需低温裂解，受体稳定性差；避免样本反复冻融。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温静置 37min，洗涤液 1:29 稀释，大鼠脑组织匀浆上清冰浴防止膜受体降解。

各微孔添加 100μL M-AChR 重组准蛋白、脑组织上清、空白稀释液。

一步酶结合混合液 200μL 每孔，避光 37℃孵育 84min。

洗涤液浸泡 50s，洗涤 5 次，彻底吸干微孔残留洗液。

单一 TMB 显色液避光孵育 19min。

终止液中和显色，横向摇晃酶标板混匀。

读取 OD450 数值，计算脑组织 M-AChR 受体含量。
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