大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附技术，固相酶标板微孔固定纯化的大鼠DPPⅣ特异性抗体，加入标准品与待测大鼠生物样本，样本中的DPPⅣ抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离成分，加入HRP标记的DPPⅣ检测抗体，形成特异性免疫复合物，经充分洗涤后显色底物反应显色，显色深浅与DPPⅣ含量正相关，终止反应后通过标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒

英文名称：DPPⅣ ELISA Kit
货号：Y-E1281

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测限0.08ng/mL，可检测大鼠血清、组织中低丰度DPPⅣ蛋白

检测范围：0.1ng/mL～12ng/mL，适配大鼠代谢、糖尿病模型样本检测

反应时间：整体反应时长110分钟，抗体特异性结合80分钟，显色反应30分钟

保存条件：所有试剂组分2～8℃避光冷藏，严禁冷冻结冰，否则酶活性失效

有效期：原装试剂盒有效期6个月，开封后密封保存，25天内用完

显色系统：优化型TMB显色体系，反应速率均匀，显色饱和性好，无局部色差

检测波长：450nm主波长检测，600nm辅助校正波长

标准曲线绘制：6个浓度梯度标准品，四参数逻辑拟合，R²≥0.996，检测精度高

特异性：专一识别大鼠DPPⅣ抗原，与DPP家族其他亚型蛋白无交叉反应，无非特异性结合

重复性：板内CV≤3.8%，板间CV≤5.8%，重复性优于行业标准

注意事项：样本采集后避免溶血，溶血样本会干扰显色反应；试剂使用前需平衡至室温；孵育过程保持湿度恒定，防止孔板干燥；读数需在终止反应后15分钟内完成，避免数值漂移。
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：

试剂盒提前 29min 室温复温，浓缩洗涤液 1:21 稀释，大鼠血清样本去除纤维蛋白沉淀。

微孔板设置 DPPⅣ 梯度标准孔、血清样本孔、空白对照孔，每孔 100μL 液体。

酶标捕获抗体 100μL 每孔，封板 37℃孵育 81min。

洗涤浸泡 33s，洗涤 5 次，吸干微孔残留洗液。

避光显色液 100μL，37℃显色 16min。

滴加终止液充分混匀微孔液体。

读取 450nm 吸光度，计算 DPPⅣ 酶蛋白浓度。
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