大鼠复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，酶标板固定大鼠CPSA特异性抗体，加入标准品与待测大鼠前列腺组织、血清样本，样本中的CPSA抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合成分，加入酶标记的CPSA检测抗体，形成稳定的夹心免疫结构，再次洗板后加入显色底物显色，终止后测定吸光度，显色深浅与CPSA含量正相关，通过标准曲线计算样本浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒

英文名称：cPSA ELISA Kit
货号：Y-E1630

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测限0.09ng/mL，可检测大鼠前列腺组织、血清中微量CPSA

检测范围：0.15ng/mL～22ng/mL，适配大鼠前列腺损伤、肿瘤模型检测

反应时间：总时长105分钟，抗体结合75分钟，底物显色30分钟

保存条件：2～8℃避光冷藏，所有试剂严禁冷冻，冷冻会导致抗原抗体失效

有效期：原装试剂盒有效期6个月，开封后30天内使用完毕

显色系统：高稳定TMB显色系统，显色均匀，批次色差小

检测波长：450nm主波长，630nm辅助校正波长

标准曲线绘制：6梯度标准品稀释，四参数拟合曲线，R²≥0.996，精度极高

特异性：专一识别大鼠复合前列腺特异性抗原，与游离PSA及其他腺体抗原无交叉反应

重复性：板内CV≤3.5%，板间CV≤5.5%，重复性优异

注意事项：样本避免溶血、脂血，防止干扰特异性结合；试剂平衡至室温后再开盖使用；孵育过程密封保湿，防止孔液蒸发；标准品梯度稀释精准，保证曲线准确性。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温平衡 36min，洗涤缓冲液 1:28 稀释，大鼠前列腺组织匀浆冰浴防止蛋白降解。

微孔板设置 CPSA 梯度标准孔、组织上清孔、空白孔，每孔 100μL 液体。

酶标记特异性抗体 100μL 每孔，封板 37℃避光孵育 83min。

洗涤浸泡 46s，洗涤 5 次，垂直吸干微孔残留洗液。

单一 TMB 显色液避光孵育 19min。

终止液中和显色，横向摇晃混匀酶标板。

检测 OD450，计算大鼠 CPSA 复合抗原浓度。
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