本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术，酶标板预先包被大鼠IP-10特异性捕获抗体，加入标准品和待测大鼠生物样本，样本中的IP-10抗原被固相抗体特异性捕获，洗板除去未结合杂质，加入酶标记的IP-10检测抗体，形成夹心免疫复合物，再次洗板后加入TMB底物显色，终止后测定OD值，依据标准曲线定量检测样本中IP-10的表达水平。
基本参数：
产品名称：大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒
英文名称：IP-10 ELISA Kit
货号：Y-E1389
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测限0.05pg/mL，超灵敏检测炎性趋化因子微量表达
检测范围：0.1pg/mL～40pg/mL，适配大鼠炎症、免疫应激模型检测
反应时间：总时长120分钟，孵育90分钟，显色30分钟
保存条件：2～8℃避光冷藏，趋化因子标准品单独低温保存
有效期：原装有效期6个月，开封后20天内使用完毕
显色系统：超灵敏增强型TMB显色系统
检测波长：450nm检测，630nm背景校正
标准曲线绘制：7梯度低浓度稀释，四参数拟合，R²≥0.992
特异性：特异性结合大鼠CXCL10/IP-10，与其他趋化因子无交叉反应
重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%
注意事项：炎性样本采集后立即低温离心；避免样本反复冻融导致蛋白降解；孵育避光保湿；严格控制显色时间。
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒组分室温静置 30min，洗涤液 1:25 稀释，大鼠细胞培养上清过滤去除细胞残渣。
微孔板分孔添加 100μL IP-10 梯度标准品、待测上清、空白缓冲液。
酶标记二抗 100μL 每孔，封板 37℃避光孵育 75min。
洗涤浸泡 42s，洗涤 5 次，垂直吸干微孔水分。
避光显色液 100μL，室温避光显色 19min。
硫酸终止液中和显色体系，摇匀微孔液体。
酶标仪读取 OD450，计算 IP-10 趋化因子表达量。
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