大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA原理，特异性检测大鼠PAI-1指标。酶标板微孔固定PAI-1纯化捕获抗体，样本中的PAI-1抗原与固相抗体高效结合，洗板后加入酶标记特异性检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。底物显色深浅与样本PAI-1含量呈正相关，通过标准曲线回归分析，可精准定量大鼠PAI-1的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒

英文名称：PAI-1 ELISA Kit
货号：Y-E1454

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤2.2pg/mL

检测范围：4.5pg/mL - 200pg/mL

反应时间：全程100分钟，孵育50分钟，显色30分钟

保存条件：2-8℃避光保存，标准品-20℃冻存，避免反复冻融

有效期：未开封10个月，分装标准品有效期3个月

特异性：专一识别大鼠PAI-1亚型，与PAI-2无交叉反应，特异性极强

重复性：板内CV≤4%，板间CV≤6%

注意事项：样本采集后快速低温离心，PAI-1易活化降解；洗涤步骤需彻底，降低背景误差。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒全部试剂室温平衡 30min，倍比稀释 PAI-1 标准品，样本离心稀释后上样，空白孔加稀释液，每孔 50μL。

直接加入酶标记工作液 50μL，封板膜密封，37℃孵育 65min。

洗板 6 轮，每轮洗液浸泡 33s，倒扣板条拍净废液。

显色 A 液、B 液各 50μL 添加混匀，避光显色 18min。

滴加终止液 50μL 终止酶促反应。

酶标仪 450nm 检测 OD 吸光度。

根据标准曲线计算样本 PAI-1 最终浓度。
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