大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，用于大鼠热休克蛋白20（HSP-20）的精准定量。酶标板微孔内包被纯化的HSP-20特异性捕获抗体，加入待测样本和标准品后，样本中的HSP-20抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗板后加入酶标记检测抗体，形成稳定的免疫夹心复合物。经底物显色、反应终止后，检测所得吸光度值与样本中HSP-20的含量呈正相关，通过标准曲线即可准确计算靶标蛋白浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测值0.15ng/mL，可精准检测大鼠组织、细胞中微量HSP-20表达。

检测范围：0.4ng/mL - 90ng/mL，适配大鼠应激损伤、抗氧化、组织保护相关模型。

反应时间：全流程90分钟快速检测，适合批量样本筛查。

保存条件：2 - 8℃冷藏避光保存，蛋白抗体组分密封防潮，防止失活。

有效期：原装试剂盒有效期8个月，恒定低温保存稳定。

特异性：特异性识别大鼠HSP-20蛋白，与其他小分子量热休克蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，重复性符合科研标准。

注意事项：细胞、组织样本需充分裂解，提取完整蛋白；样本避免高温处理，防止热休克蛋白变性；洗板彻底，减少非特异性结合。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

1. 试剂盒试剂室温放置 34min，稀释洗涤浓缩液；细胞裂解液样本高速离心去除细胞碎片。

2. 标记酶标板各类孔，标准品孔加入梯度 HSP-20 标准品 50μL，样本孔加入待测裂解上清 50μL，空白孔不加样。

3. 向所有加样孔加入酶标记抗体液 100μL，封板严实密封避光。

4. 37℃恒温避光孵育 78min，保证免疫结合完全。

5. 弃液洗板，每孔洗涤液浸泡 40s，重复洗板 6 次，微孔充分拍干。

6. 依次添加显色 A、B 底物各 50μL，轻震混匀，37℃避光显色 22min。

7. 加入终止液终止显色反应，450nm 测吸光度，标准曲线定量 HSP-20 表达量。