本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板包被有大鼠BrdU特异性捕获抗体,加入经处理的待测细胞或组织样本及标准品后,样本中的BrdU抗原与固相抗体特异性结合,洗板后加入酶标记BrdU检测抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物,经底物催化显色、终止反应后,酶标仪检测吸光度,吸光度数值与样本中BrdU含量正相关,结合标准曲线可精准定量样本中溴脱氧核苷尿嘧啶的含量,常用于细胞增殖相关检测。
基本参数:

产品名称:大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒
英文名称:BrdU ELISA Kit
货号:Y-E1126
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.5pg/mL,可精准检测细胞增殖实验中微量BrdU掺入量
检测范围:1pg/mL - 500pg/mL,适配大鼠细胞、组织增殖相关实验检测
反应时间:全流程实验耗时120分钟,包含细胞裂解、结合、显色完整流程
保存条件:试剂盒2-8℃冷藏避光保存,抗体组分需严格密封,防止失活
有效期:未开封试剂盒有效期6个月,恒温避光存放可维持试剂活性稳定
特异性:特异性识别BrdU标记位点,与普通脱氧核苷、尿嘧啶无交叉识别反应
重复性:板内、板间变异系数均<7%,增殖实验检测数据重复性极佳
注意事项:样本裂解需充分,去除杂质残留;实验全程避免核酸污染,耗材需无菌无酶,温育环境洁净避光。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

所有试剂室温平衡 32min,取出酶标板,按需取用板条,标记各组实验孔。
标准品梯度稀释制备曲线点,标准孔加 50μL 标品,细胞样本孔上样 50μL 大鼠细胞裂解上清,空白孔加稀释液。
每孔加入酶结合检测试剂 100μL,封板避光 37℃孵育 75min。
弃液洗板,洗涤液浸泡 40s / 次,循环洗板 5 次,彻底拍干微孔。
单孔加入显色工作液 100μL,避光显色 22min。
滴加 50μL 终止液终止反应,震荡混匀微孔板。
450nm 波长读数,依据标准曲线定量样本 BrdU 含量。
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