本试剂盒采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法原理，利用预先包被于酶标板微孔中的大鼠血清总补体(CH50)特异性抗体，与样本中的CH50特异性结合，再结合酶标记二抗形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过洗涤去除未结合物质，加入底物显色，显色深浅与样本中CH50含量呈正相关，通过酶标仪测定吸光度，结合标准曲线即可定量检测大鼠血清中CH50的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒
英文名称：CH50 ELISA Kit
货号：Y-E1273
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度0.1U/mL
检测范围：0.2U/mL - 8U/mL
反应时间：总反应时长90分钟
保存条件：2-8℃低温避光保存，禁止冷冻
有效期：未开封避光保存6个月
特异性：特异性识别大鼠CH50，与小鼠、兔补体无交叉反应
重复性：板内变异系数≤6%，板间变异系数≤8%
注意事项：样本需无溶血、无脂血，实验全程避免高温，试剂使用前需充分平衡至室温
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 30min，配置洗涤液、CH50 标准品梯度稀释液、样本稀释液，取出预包被酶标板条。
设空白孔、标准品孔、待测样本孔，每孔依次加入对应梯度标准品液、稀释后待测血清样本，空白孔加等量样本稀释液，每孔加一步法酶结合工作液，封板膜密封。
酶标板置于 37℃恒温孵育箱避光孵育 60min，期间避免板条晃动、阳光直射。
撕去封板膜，弃去孔内全部液体，每孔加满配置好的洗涤缓冲液，浸泡 30s 后甩干，重复洗板 5 次，每次拍干孔内残留液体。
所有孔依次加入显色底物 A 液、显色底物 B 液，轻柔震荡混匀，37℃避光显色 15min。
每孔快速加入终止液终止酶促显色反应，轻晃酶标板混匀液体。
15min 内使用酶标仪在 450nm 波长处读取各孔 OD 吸光度值，根据标准品曲线计算样本中 CH50 含量。
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