本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理,酶标板预先包被大鼠Eotaxin 1/CCL11特异性抗体。检测时,样本与标准品中的趋化蛋白抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合物质后,加入酶标记的检测抗体形成免疫复合物。经TMB显色、终止反应及吸光度检测,结合标准曲线的线性关系,精准定量大鼠样本中Eotaxin 1的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1565 |
英文名称 | Rat Eotaxin 1 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度0.22pg/mL,超高灵敏度适配炎症趋化因子检测。
检测范围:0.6pg/mL - 140pg/mL,适配大鼠血清、气道组织、炎症细胞上清。
反应时间:总时长110分钟,样本温育45分钟、酶标二抗温育40分钟、显色25分钟。
保存条件:2-8℃避光保存,稀释后试剂4℃可保存5天,禁止冷冻。
有效期:未开封有效期12个月,开封后1个月内用完。
特异性:特异性结合大鼠CCL11/Eotaxin1,与其他趋化因子无交叉反应。
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%,炎症因子检测误差可控。
注意事项:炎症样本需无菌处理,避免微生物污染;温育过程严格避光。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒室温静置 33min,稀释浓缩洗涤液,配制 Eotaxin1 标准品梯度稀释体系,酶标板编号分类,大鼠支气管肺泡灌洗液离心取上清待测。
标准品孔添加不同浓度 Eotaxin1 标准液 50μL,样本孔加入灌洗液上清 50μL,空白孔补基础稀释液 50μL,每孔加入酶标记抗体液 100μL,封板封闭。
37℃避光孵育 67min,固相夹心结合靶趋化蛋白。
揭膜倒净废液,洗涤液浸泡每孔 34s,重复洗板 6 次,吸水纸彻底拍干板条。
每孔加注显色 A、B 液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 19min。
逐孔滴加终止液 50μL 终止显色反应,轻摇酶标板混匀。
450nm 读取 OD 值,拟合标准曲线得到 Eotaxin1 检测结果。
关键字: 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1;Eotaxin 1/CCL11;ELISA试剂盒;
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