本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,定量检测大鼠体液、组织样本中的AQP-5水平。固相酶标板包被纯化的大鼠AQP-5特异性抗体,可特异性捕获样本中的AQP-5抗原,经洗板去除非特异性结合物质后,加入酶标记抗大鼠AQP-5抗体形成免疫复合物,催化底物显色,终止反应后测定吸光度,结合标准曲线即可计算出待测样本中AQP-5的准确浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1363 |
英文名称 | AQP-5 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.12ng/mL,可精准检测大鼠肺、唾液腺组织中低丰度AQP-5蛋白。
检测范围:0.25ng/mL - 11ng/mL,覆盖生理及病理状态下大鼠AQP-5蛋白表达浓度。
反应时间:标准实验时长95分钟,样本孵育65分钟,酶标抗体孵育20分钟,显色10分钟。
保存条件:全套试剂2-8℃避光保存,洗涤液可室温短期放置,浓缩试剂使用前充分混匀。
有效期:未开封有效期7个月,开封后密封防潮保存,25天内有效。
特异性:特异性识别大鼠AQP-5蛋白,与AQP其他亚型及哺乳动物同源蛋白无交叉反应。
重复性:板内变异系数≤6%,板间变异系数≤7.5%,实验重复性达标。
注意事项:样本采集后需快速低温保存,避免蛋白氧化降解,孵育过程需保证湿盒密封,防止孔板干燥。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 30min,稀释浓缩洗涤液,配置系列浓度 AQP-5 标准品,取用实验所需板条,剩余板条密封冷藏。
酶标板分区标记,标准品孔加不同浓度标准液 50μL,样本孔加入处理后待测样本 50μL,空白孔无添加。
所有非空白孔加入酶结合物 100μL,封板后 37℃孵育 60min。
甩去孔内液体,洗涤液洗板每次浸泡 35s,拍干,重复洗板 4 次。
每孔加入显色底物 A、B 各 50μL,避光混匀,37℃显色 14min。
加入终止液 50μL,充分混匀终止反应。
450nm 波长检测吸光度,通过标准曲线计算样本 AQP-5 含量。
关键字: 大鼠水通道蛋白5;AQP-5;ELISA试剂盒;
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