大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的大鼠DHEA-S抗体包被于酶标板微孔内，形成固相抗体。检测时，样本、标准品中的DHEA-S可与固相抗体特异性结合，再加入酶标记检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体的免疫复合物。经充分孵育洗涤后，加入底物液进行显色反应，底物在结合酶的催化下生成有色产物，产物颜色深浅与样本中DHEA-S含量呈正相关，最后通过酶标仪测定吸光度值，结合标准曲线即可精准计算样本中大鼠DHEA-S的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 8ng/mL

反应时间：整体实验操作时长90分钟，温育分两步，分别为30分钟、60分钟

保存条件：试剂盒未开封2-8℃冷藏保存，浓缩洗涤液可室温避光保存，严禁冷冻

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月，开封后配套试剂1个月内用完

特异性：仅特异性识别大鼠DHEA-S，与人体、小鼠同源交叉物质交叉反应率＜5%，无其他类固醇激素交叉反应

重复性：板内变异系数CV≤6%，板间变异系数CV≤8%，实验重复性良好

注意事项：样本需避免溶血、脂血，血清样本采集后需低温离心分离；温育过程需严格避光，避免强光直射影响酶促反应；试剂使用前需充分混匀，禁止混用不同批次试剂盒试剂。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

包被板条提前室温平衡 30min，设置空白孔、标准品孔、待测样品孔，每孔加入对应浓度 DHEA-S 标准品、稀释后待测样本，空白孔加等量样本稀释液，每孔加样量 50μL。

所有孔内即刻加入酶标记结合液 50μL，封板膜密封酶标板，37℃恒温孵育 60min。

揭去封板膜，弃去孔内全部液体，每孔加满洗涤工作液，静置 30s 后甩干，重复洗板操作 5 次，最后一次拍净孔内残留液体。

每孔依次加入显色液 A 液 50μL、显色液 B 液 50μL，轻柔震荡酶标板混匀，避光 37℃显色 15min。

显色结束后快速向每孔加入终止液 50μL，轻微晃动板板终止酶促显色反应。

10min 内使用酶标仪设定 450nm 波长，依次读取各孔 OD 吸光度数值。

根据标准品浓度与对应 OD 值绘制标准曲线，代入样品 OD 值计算样本中 DHEA-S 实际浓度。