大鼠维生素B12(VB12)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争性酶联免疫吸附试验原理，利用大鼠VB12抗原与抗体的特异性免疫结合反应实现定量检测。酶标板固相包被VB12抗原，待测样本中的VB12抗原与板上固相抗原竞争结合特异性抗体，孵育后洗涤除去未结合组分，加入酶标记二抗及显色底物进行酶促反应。样本中VB12含量与显色吸光度值呈负相关，通过标准曲线拟合，可准确检测大鼠样本中VB12的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤3pg/mL

检测范围：5pg/mL - 200pg/mL

反应时间：总时长110分钟，样本孵育60分钟，酶孵育30分钟，显色20分钟

保存条件：试剂盒2-8℃冷藏，严禁冷冻，试剂开封后密封避光

有效期：未开封9个月，开封后30天内有效

特异性：专一结合大鼠VB12，与叶酸、其他B族维生素无交叉反应

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：溶血样本会严重干扰检测结果，需舍弃；温育温度波动不得超过±2℃；洗涤步骤需充分，避免残留洗液影响数值。
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

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实验操作流程：

试剂与板条室温放置 30min，配制 VB12 标准品梯度浓度，样本按照要求稀释，每孔加样 50μL，空白孔只加稀释液。

直接加入酶标记工作液 50μL，封板膜密封，37℃孵育 55min。

洗板操作 6 轮，每轮加满洗涤液静置 30s 后弃净，拍干微孔。

依次添加显色 A、B 液各 50μL，震荡混匀，37℃避光显色 14min。

滴加终止液 50μL，混匀终止底物反应。

酶标仪 450nm 波长检测各孔 OD 值。

根据标准曲线方程计算样本 VB12 浓度，校正稀释倍数。