人纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒

本试剂盒采用经典双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先固定抗人Plg特异性抗体，加入不同浓度标准品及待测样本，样本中的Plg抗原可与固相抗体发生特异性免疫结合，孵育结束后洗涤去除孔内未结合物质，加入辣根过氧化物酶标记的Plg配对抗体，形成稳定免疫夹心复合物，底物催化显色后终止反应，检测各孔吸光度，OD值与Plg含量呈正相关，通过标准曲线可定量分析样本中Plg的含量。
产品参数：

‌灵敏度：0.09ng/mL

检测范围：0.15-9.6ng/mL

反应时间：37℃孵育 65min，二抗 40min，避光显色 14min

保存条件：试剂盒 2-8℃，开盖试剂 1 个月内用完，过期弃用

显色系统：预混型即用 TMB 显色液

检测波长：450nm+630nm 双波长校正

标准曲线绘制：直接坐标线性拟合，舍弃极值点保证曲线相关性

注意事项：溶血样本中血红蛋白会干扰显色结果，重度溶血样本直接舍弃检测
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 30min 回温，配制一步法抗原酶结合液，标记微孔板孔位。

每孔预加酶结合液 55μL，标品孔加梯度 Plg 标准品 45μL，样品孔加预处理样本 45μL，空白孔加稀释液 45μL。

封板 37℃孵育 62min，倾倒废液，洗板 5 次，每次浸泡 30s，充分拍干微孔板。

每孔加入 TMB 显色液 100μL，震荡混匀。

避光 37℃显色 17min，观察颜色梯度。

滴加终止液 50μL 终止显色。

450nm 测定 OD 值，拟合标准曲线定量 Plg。