本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法测定样本中人纤维蛋白含量,微孔板孔壁包被有高特异性抗人纤维蛋白抗体,加入标准品与待测样本后,样本中的纤维蛋白抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除非结合组分后,加入辣根过氧化物酶标记的二抗完成夹心结合,经底物显色、终止反应后检测OD值,根据OD值与纤维蛋白含量的正相关关系,通过标准曲线计算样本中纤维蛋白的含量。
产品参数:
产品名称 | 人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2800 |
英文名称 | Human Fibrin ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.3μg/mL
检测范围:0.6-38.4μg/mL
反应时间:封闭 25min,样本孵育 95min,二抗 58min,显色 20min
保存条件:整套试剂 2~8℃避光储存,洗涤液结晶 37℃水浴融化即可
显色系统:HRP 催化 TMB 显色,2M 硫酸终止
检测波长:450nm 为主波长读数
标准曲线绘制:标准品梯度稀释做线性回归,R²≥0.98 方可使用
注意事项:样本不可发生凝固,凝固后纤维蛋白交联无法被试剂盒识别,结果严重失真
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒常温放置 32min 复温,配置一步法酶复合物工作液,排布实验孔。
每孔先加酶混合液 60μL,标准品孔加梯度 Fibrin 标准液 40μL,样品孔加待测样本 40μL,空白孔加稀释液 40μL。
封板 37℃孵育 56min,甩净液体,洗板 4 次,每次浸泡 26s,吸水纸拍干。
每孔加入 TMB 显色底物 100μL,摇晃混匀。
室温避光显色 11min。
加入终止液 50μL 终止显色。
450nm 测 OD 值,标准曲线计算纤维蛋白含量。
关键字: 人纤维蛋白;Fibrin;ELISA试剂盒;
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