本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔固相包被抗人MUC5AC特异性抗体，加入标准品及待测样本后，样本中的粘液素5AC抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗涤去除游离杂质，加入HRP标记的MUC5AC检测抗体形成夹心复合物，底物显色后终止反应，吸光度值与样本中MUC5AC含量成正比，通过标准曲线可精准定量检测目标蛋白含量。
基本参数：
产品名称：人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒
英文名称：MUC5AC Elisa Kit
货号：Y-E345
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 0.3ng/mL
检测范围：0.6ng/mL - 38ng/mL
反应时间：总操作 115min，捕获孵育 50min，酶孵育 40min，显色 15min
保存条件：未拆封 2-8℃；浓缩洗涤液室温存放无结晶即可正常使用
显色系统：TMB 双液混合显色
检测波长：450nm 校正 630nm
标准曲线绘制：非线性四参数拟合标准曲线，适配宽浓度区间样本检测
注意事项：痰液样本需离心去除粘液絮状物，否则极易造成洗板不净
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 30min，倍比稀释 MUC5AC 标准品，痰液 / 细胞上清样本稀释预处理，对酶标板孔位编号标记。
分别向空白、标准、样本孔加入对应稀释液、标准品、待测样本，加样不触碰板底包被膜。
直接向全部反应孔加入酶联抗体工作液，轻晃酶板混匀体系，采用一步法省去分步孵育。
封板密封，37℃避光孵育 60min，全程避免强光照射。
废液弃除，洗板液浸泡每孔 33s，重复洗板 5 次，充分拍干微孔。
避光加入显色底物混合液，室温显色 18min，最高浓度标准孔显色饱满即可终止。
终止液终止显色，酶标仪 450nm 检测 OD 值，计算样本 MUC5AC 粘蛋白浓度。
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