人胸腺肽(Thymosin)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板预先包被抗人胸腺肽特异性抗体，能够特异性捕获样本与标准品中的胸腺肽抗原，经孵育结合、洗涤去除游离杂质后，加入HRP标记的胸腺肽配对检测抗体，形成夹心免疫复合物，TMB底物显色后终止反应，检测各孔吸光度，通过标准曲线精准定量检测样本中胸腺肽的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：2pg/mL

检测范围：3.9~250pg/mL

反应时间：室温孵育 112min，酶二抗 71min，显色 21min

保存条件：2～8℃避光，多肽标准品禁止多次冻融

显色系统：双组分显色底物，终止后颜色稳定

检测波长：450nm，650nm 参比

标准曲线绘制：对数浓度与 OD 值拟合标准曲线

注意事项：注射胸腺肽药物后的血清样本浓度会一过性升高，需标注用药史
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 27min，稀释一步法酶标一抗液，设置标品梯度孔与待测血清孔。

各孔预加酶结合液 50μL，标准孔加梯度胸腺肽标准液 50μL，样本孔加稀释血清 50μL，空白孔补稀释液。

封板 37℃孵育 71min，弃液后洗板 5 次，每次浸泡 34s，彻底拍干孔板残留液体。

依次添加显色 A、B 液各 50μL 混匀。

避光 37℃显色 16min。

加入终止液 50μL 终止酶促反应。

450nm 检测 OD 值，定量总胸腺肽浓度。