本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，预先将人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白特异性抗体包被于酶标板微孔，加入梯度标准品及待测样本后，样本中的aFABP与固相捕获抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质，加入酶标记aFABP检测抗体形成免疫夹心结构，经显色、终止反应后检测OD值，结合标准曲线定量检测样本中aFABP的表达含量。
基本参数：
产品名称：人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(aFABP)ELISA试剂盒
英文名称：a-FABP Elisa Kit
货号：Y-E775
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出 0.08ng/mL
检测范围：0.16ng/mL - 10.24ng/mL
反应时间：抗原孵育 44min，酶结合 34min，显色 12min
保存条件：未拆封试剂盒 2～8℃；浓缩稀释液室温储存即可
显色系统：即用型单一 TMB 显色液
检测波长：450nm 测定吸光值
标准曲线绘制：双复孔检测取均值，建立标准曲线定量
注意事项：肥胖血清样本建议 1:10 稀释后检测，防止超出线性区间
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温静置 31min，梯度稀释 aFABP 标准品，脂肪细胞上清样本稀释处理，标注酶标板微孔类型。
一孔一枪头完成加样，空白孔加稀释液，标准孔加梯度 aFABP 标准液，样本孔加待测上清。
直接向全部微孔加入酶标特异性抗体工作液，低速震荡混匀 15s。
封板封口后 37℃避光孵育 67min，避光环境放置酶标板。
弃液洗板 5 次，每次浸泡 33s，倒扣酶板拍干所有微孔残留液体。
避光添加显色底物混合液，37℃避光显色 15min，把控显色深浅。
终止液终止显色，酶标仪 450nm 测 OD 值，计算 aFABP 具体浓度。
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