人旋毛虫抗体(Trichinella Ab)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接法ELISA检测原理，微孔板预先包被纯化的旋毛虫特异性抗原，加入待测样本与标准品后，样本中的人旋毛虫抗体与固相抗原特异性结合，孵育洗涤去除未结合物质，加入辣根过氧化物酶标记的抗人抗体，结合已固定的特异性抗体，经底物显色、终止反应后检测OD值，OD值与旋毛虫抗体含量呈正相关，通过标准曲线定量检测其含量。
产品参数：

‌灵敏度：血清最低阳性稀释度 1:160

检测范围：血清稀释梯度 1:80~1:5120

反应时间：样本室温孵育 130min，二抗 80min，显色 26min

保存条件：2～8℃避光，旋毛虫抗原包被板防刮擦

显色系统：HRP 标记羊抗人二抗介导 TMB 显色

检测波长：450nm，650nm 校正背景

标准曲线绘制：设定临界 Cutoff 值，OD＞阈值判定抗体阳性，无定量标准曲线

注意事项：包虫、其他线虫感染会出现交叉假阳性，需结合流行病学史综合诊断
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒常温静置 24min 回温，稀释一步法酶标二抗液，设置阴阳对照孔、标本孔、空白孔。

各孔预加酶结合液 50μL，对照孔加入阴阳性质控液 50μL，样本孔加患者血清稀释液 50μL，空白孔加缓冲液。

封板 37℃孵育 74min，弃净液体，洗板 5 次，每次浸泡 32s，彻底拍干微孔板。

依次添加显色 A、B 液各 50μL 混匀。

避光 37℃显色 17min。

滴加终止液 50μL 终止显色。

450nm 测定 OD，依据临界值判定旋毛虫抗体阴阳性。