本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板预先包被人FPA特异性捕获抗体,加入标准品与待测血浆样本,样本中的FPA抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合组分,加入酶标记FPA检测抗体形成夹心免疫复合物,充分洗涤后加入显色底物进行酶促显色反应,终止显色后测定吸光度,显色深浅与FPA含量成正比,通过标准曲线定量检测样本中FPA的浓度。
产品参数:
产品名称 | 人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2832 |
英文名称 | FPA ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出下限 8pg/mL
检测范围:30~1920pg/mL
反应时间:样本温育 55min,二抗 40min,显色 14min,合计 109min
保存条件:全套试剂 2~8℃,浓缩洗涤液稀释后 24h 内用完
显色系统:HRP 介导 TMB 显色终止
检测波长:450nm 读数,620nm 校正背景
标准曲线绘制:七点倍比稀释,直线回归构建标准曲线
注意事项:采血需使用抗凝管,凝血会导致 FPA 大量释放结果偏高
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
血浆样本前处理:抗凝血浆稀释配比,涡旋混匀,室温静置 7min;试剂室温平衡 26min。
加样密封孵育:各孔加入标准品、待测样本与酶工作液,封板 37℃孵育 59min。
微孔洗涤:弃液洗涤浸泡 30s,洗板 4 次,拍干微孔残留洗液。
底物显色:加入显色 A、B 液,避光混匀,37℃显色 12min。
终止反应:加入终止液摇匀终止显色。
仪器检测:450nm 读取 OD 吸光度值。
曲线计算:标准曲线换算稀释倍数,得出血浆 FPA 浓度。
关键字: 人血纤肽/纤维蛋白肽A;FPA;ELISA试剂盒;
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