人异丙肾上腺素(iso-Hyd)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争法ELISA检测原理，微孔板预先包被异丙肾上腺素固相抗原，加入待测样本、标准品和酶标记特异性抗体，样本中的iso-Hyd与固相抗原竞争结合酶标抗体，孵育完成免疫反应后洗涤去除游离物质，加入显色底物进行酶促显色，终止反应后检测吸光度，吸光度与样本中iso-Hyd浓度呈负相关，通过标准曲线反向定量检测其含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低可测 0.03ng/mL

检测范围：0.1~6.4ng/mL

反应时间：竞争法孵育 85min，二抗 40min，显色 17min，总 142min

保存条件：试剂盒 2~8℃，小分子标准品分装冻存减少降解

显色系统：A+B 混合 TMB 显色体系

检测波长：450nm 主波长读数

标准曲线绘制：竞争抑制法六参数拟合标准曲线

注意事项：样本采集全程避光，儿茶酚胺类物质极易光照氧化
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

血浆样本稀释预处理：抗凝血浆稀释配比涡旋混匀，室温静置 9min；试剂室温复温 28min。

一步加样孵育：微孔加入标准品、待测血浆与酶工作液，封板 37℃孵育 63min。

微孔洗涤：弃液洗涤浸泡 35s，洗板 5 次，拍干微孔内液体。

底物显色：加入显色 A、B 液避光混匀，37℃显色 15min。

终止反应：加入终止液轻晃酶标板混匀。

光度检测：450nm 波长读取 OD 值存档数据。

血药浓度计算：标准曲线换算稀释倍数得到异丙肾上腺素血浆浓度。