本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理,微孔板预先包被人IDO特异性抗体,加入标准品与待测组织、细胞上清样本,样本中的IDO抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合杂蛋白,加入酶标记IDO检测抗体形成免疫复合物,充分洗涤后显色、终止反应,检测吸光度并结合标准曲线,定量测定样本中IDO的表达含量。
产品参数:
产品名称 | 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E952 |
英文名称 | IDO Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检出 0.06ng/mL
检测范围:0.2~12.8ng/mL
反应时间:样本孵育 75min,酶标抗体 45min,显色 15min,合计 135min
保存条件:2~8℃储存,底物液必须遮光存放
显色系统:避光稳定型 TMB 显色底物
检测波长:450nm 读数,630nm 扣除孔间本底
标准曲线绘制:八点梯度稀释,线性回归构建标准曲线
注意事项:炎症诱导 IDO 表达升高,需结合炎症指标联合判读结果
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
细胞上清 / 组织匀浆稀释:样本稀释液稀释上清混匀,室温静置 12min;试剂盒整套试剂室温平衡 32min。
微孔加样封板孵育:设置空白、标准、样本孔,加入对应液体与酶结合试剂,密封酶标板 37℃孵育 71min。
洗板除杂:洗涤液浸泡微孔 45s,洗板 5 次,彻底拍干微孔废液。
底物显色:加入显色 A、B 液避光混匀,37℃显色 18min。
终止液终止:准时加入终止液轻摇酶标板混匀。
光度检测:450nm 波长读取 OD 吸光度并归档。
蛋白定量:标准曲线带入样本 OD 值,换算稀释倍数得出 IDO 浓度。
关键字: 人吲哚胺2,3-双加氧酶;IDO;ELISA试剂盒;
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