人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒

本试剂盒运用竞争法酶联免疫吸附试验原理进行检测，酶标板预先包被人游离原卟啉抗原，检测时将待测样本、标准品与定量的特异性一抗同步加入微孔，样本中的游离原卟啉与固相包被抗原竞争结合有限的抗体结合位点，孵育充分反应后洗涤，加入HRP标记二抗进行结合反应，再次洗涤后加入底物显色、终止液终止反应，样本中游离原卟啉含量越高，竞争结合的抗体越多，固相抗原结合的抗体越少，显色越浅，通过检测OD值并拟合标准曲线，可定量测定样本中FEP的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最小检测浓度 0.22nmol/L

检测范围：0.45nmol/L - 28.8nmol/L

反应时间：室温结合 60min，酶结合物孵育 45min，避光显色 20min

保存条件：试剂盒 2-8℃避光保存；开封后板条装入自封袋加干燥剂冷藏，1 个月内用完

显色系统：OPD 底物显色系统，酸性终止液终止反应

检测波长：492nm 测定吸光度值

标准曲线绘制：使用四参数拟合，设置空白孔调零，根据曲线方程换算样本含量

注意事项：操作全程尽量避光，原卟啉见光易分解，样本全程遮光处理
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒提前室温回温 28min，配制 FEP 标准品稀释梯度，红细胞裂解后制备待测样本稀释液，划分酶标板孔位编号。

空白对照孔加入样本稀释液，各标准孔添加梯度 FEP 标准溶液，样本孔加入处理完毕待测样本，加样量严格统一。

直接向所有反应孔加入酶标记特异性结合抗体工作液，轻拍板侧混匀液体，不进行前置孵育与初次洗板。

封板膜封闭酶标板，37℃恒温烘箱避光孵育 65min，保证孵育环境无温差波动。

移除封板膜，倾倒废液，洗板液注满每孔浸泡 35s，重复洗板 5 轮，每次拍干板孔内液体。

避光添加显色底物混合液，室温避光反应 18min，当最高浓度标准孔显深蓝色时即可准备终止。

加入终止液终止显色，酶标仪 450nm 读数，依托标准曲线方程计算样本游离原卟啉具体浓度。