小孢子菌属通用PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒靶向小孢子菌属菌株的共有保守基因序列设计扩增体系，可广谱检测犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、纳米小孢子菌等所有小孢子菌属致病菌株。产品通用性强、覆盖菌株全面，特异性无其他真菌交叉干扰，检测高效便捷，适用于临床皮肤真菌感染初步筛查、规模化宠物养殖真菌病普查、环境微生物菌群检测。

基础原理：

毛发、皮屑样本提取全部真菌 DNA，引物靶向小孢子菌属共有 18S rRNA 保守基因扩增。

只要样本存在任意一种小孢子菌，即可扩增出目标核酸条带，实现属筛查。

搭配真菌提取内参，确认样本真菌核酸提取成功，避免假阴性。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。

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