本试剂盒聚焦海豹分支杆菌核酸检测,靶向海豹源专属分枝杆菌基因序列构建PCR体系,可精准检测海洋哺乳动物样本中的海豹分支杆菌。产品特异性强、无其他分枝杆菌交叉反应,适用于海洋动物疫病监测、水族馆动物健康检测、海洋人畜共患病病原筛查。
产品名称 | 海豹分支杆菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014462 |
英文名称 | Mycobacterium pinnipediiPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

海洋哺乳动物脏器提取分枝杆菌 DNA,靶向海豹分枝杆菌特有间隔基因扩增。
探针水解产生特异性荧光信号,无靶菌则无荧光。
海水样本脱盐缓冲液,去除盐分对 PCR 体系破坏。
操作步骤:

样本制备:
使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。
建议DNA浓度≥20 ng/μL,A260/A280比值1.8~2.0。
反应体系配制(20 μL体系示例):
预混PCR Master Mix(含染料、dNTPs、Taq酶等)
特异性引物混合液
模板DNA(2~5 μL)
补充无核酸酶水至终体积。
PCR扩增程序:
预变性:95℃ 5分钟;
循环阶段(40~45 cycles):95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
熔解曲线分析:60~95℃(可选,用于验证扩增特异性)。
结果判读:
阳性:Ct值≤35且熔解曲线峰单一;
阴性:Ct值≥40或无扩增曲线;
可疑:35<Ct值<40,建议复测或结合熔解曲线分析。
注意事项:

所有耗材必须无核酸酶,吸头一次性使用,禁止重复吸取;
阳性模板拷贝浓度高,开盖操作轻柔,避免气溶胶扩散造成全域污染;
试剂融化后冰上放置不超过 2 h,用完立即放回 - 20℃;
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃;
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测,禁止人体临床检测;
移液器、操作台定期紫外消毒,长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
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关键字: 海豹分支杆菌;PCR检测试剂盒;
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