丝状支原体丝状亚种型PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒靶向丝状支原体丝状亚种特异性基因序列构建PCR体系，可精准检测反刍动物样本中的该亚种支原体核酸。该病原是反刍动物传染性胸膜肺炎的重要病原，试剂盒分型精准、灵敏度高，适用于牛羊疫病确诊、病原亚型鉴定、区域疫病防控。

基础原理：

反刍兽肺组织提取支原体 DNA，引物靶向丝状亚种型特异性插入基因扩增，分型鉴别。

双色荧光探针区分丝状亚种与山羊亚种支原体。

肺部组织脂肪去除缓冲液，提升核酸纯度。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。

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