本试剂盒聚焦猪捷申病毒核酸检测，靶向病毒保守功能基因设计特异性引物，可精准识别猪捷申病毒感染样本，有效鉴别其引发的猪脑炎、腹泻、呼吸道炎症等复合型病症。试剂盒扩增效率高、特异性极强，无其他猪源病原交叉扩增，适配脑组织、血清、肠道组织等多类样本。主要用于猪捷申病毒临床病例确诊、猪场疫病传播溯源、仔猪多发病症病因排查及相关病原科研检测。
产品名称 | 猪捷申病毒PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014626 |
英文名称 | Porcine Teschovirus(PTV)RTPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
从猪脑、脊髓、肠道样本中提取病毒 RNA，反转录得到 cDNA。
引物靶向捷申病毒 VP1 基因，该基因序列种属特异性强，不易出现非特异扩增。
实时荧光 PCR 扩增判读 Ct 值，诊断猪捷申病毒引发的脑炎、腹泻类病症。
操作步骤：
样本制备：
使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。
建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反应体系配制（20 μL体系示例）：
预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特异性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
补充无核酸酶水至终体积。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。
结果判读：
阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；
阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；
可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。
注意事项：
分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染
无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服
试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心
避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作
防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台
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