本试剂盒基于实时荧光PCR技术,特异性针对蛙病毒基因组保守区域设计检测体系,可精准检测两栖类动物样本中的蛙病毒核酸。蛙病毒是引发蛙类、蟾蜍等两栖动物大规模死亡的主要病原,传染性强、致死率高,本试剂盒特异性高、无交叉反应,可适配蛙类组织、水体环境样本等多种检测样本,适用于水产养殖疫病防控、两栖动物种质资源保护、水域生态病原监测等场景。
产品名称 | 蛙病毒PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014668 |
英文名称 | RanavirusPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

引物靶向蛙病毒保守 DNA 聚合酶基因,可特异性识别蛙病毒家族病原核酸。
提取蛙类组织、水体样本内病毒核酸,经反复热循环扩增靶标片段提升检出灵敏度。
根据扩增结果判定样本是否存在蛙病毒感染,用于两栖类疫病监测。
操作步骤:

样本制备:
使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。
建议DNA浓度≥20 ng/μL,A260/A280比值1.8~2.0。
反应体系配制(20 μL体系示例):
预混PCR Master Mix(含染料、dNTPs、Taq酶等)
特异性引物混合液
模板DNA(2~5 μL)
补充无核酸酶水至终体积。
PCR扩增程序:
预变性:95℃ 5分钟;
循环阶段(40~45 cycles):95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
熔解曲线分析:60~95℃(可选,用于验证扩增特异性)。
结果判读:
阳性:Ct值≤35且熔解曲线峰单一;
阴性:Ct值≥40或无扩增曲线;
可疑:35<Ct值<40,建议复测或结合熔解曲线分析。
注意事项:

分区操作:试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行,避免交叉污染
无菌操作:使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服
试剂准备:所有试剂使用前需完全融化,震荡混匀后短暂离心
避光保存:含荧光探针的试剂需避光保存和操作
防止污染:阳性对照操作需最后进行,实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台
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