本试剂盒基于特异性PCR扩增技术,针对猪乳头瘤病毒保守核酸序列设计特异性引物,可精准检测猪组织、病变皮肤等样本中的猪乳头瘤病毒核酸。试剂盒配套完整扩增反应体系,灵敏度高、特异性强,不会与猪常见其他病原发生交叉反应,能够快速鉴别猪乳头瘤病毒感染情况,适用于生猪养殖疫病筛查、病变样本病原确诊及流行病学调查工作,为猪皮肤增生性病变的病因诊断提供可靠的分子学依据。
产品名称
猪乳头瘤病毒PCR检测试剂盒
货号
YS-P014810
英文名称
Swine PapillomavirusPCR
规格
50T
有效期
12个月
保存
-20℃保存
基础原理:
试剂盒提取样本内病毒基因组 DNA,采用特异性引物靶向扩增猪乳头瘤病毒保守基因片段;
通过 Taq DNA 聚合酶催化引物延伸反应,完成目标核酸片段的指数级扩增;
借助琼脂糖凝胶电泳观察扩增条带大小,结合条带有无判定样本是否携带该病毒。
操作步骤:
1. 样本处理
提取待测样本RNA,建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释(示例:6个梯度)
标记离心管(7至2号),每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照,避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录:50℃ 15分钟(可选,根据病毒RNA特性调整)。
预变性:95℃ 2分钟。
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号),共40循环。
注意事项:
避免反复冻融试剂,解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途,不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备,避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则,运输时使用干冰或冰袋保存。
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