本试剂盒为染料法荧光定量PCR检测产品，利用荧光染料与PCR扩增产物结合发光的原理，实现肺炎支原体核酸的实时定量检测。相较于普通PCR试剂盒，可实时监测扩增全过程，通过荧光信号变化精准判定样本病原载量，兼具高灵敏度与高特异性，操作简便、成本可控，无探针设计成本，适用于肺炎支原体感染的早期诊断、感染程度评估及治疗效果动态监测。
产品名称 | 肺炎支原体荧光定量PCR检测试剂盒（染料法） | 货号 | YS-P015023 |
英文名称 | Mycoplasma pneumoniae Quantitative Real-time PCR Detection Kit (Dye Method) | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
染料法依托 SYBR Green 荧光染料，染料嵌入所有双链扩增产物中，扩增产物越多荧光强度越高，可实时监测扩增进程。
引物靶向肺炎支原体 P1 黏附蛋白基因保守序列，保证扩增仅针对肺炎支原体核酸，特异性稳定。
仪器通过 Ct 值判定样本阳性与否，还可依据标准曲线对样本内支原体核酸载量进行相对定量分析。
操作步骤：
1. 样本处理
提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）
标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。
注意事项：
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。
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关键字： 肺炎支原体荧光定量（染料法）;PCR检测试剂盒;
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