本试剂盒采用多重PCR技术，可一次性同步检测肺炎链球菌、肺炎支原体、衣原体、嗜血杆菌等多种常见呼吸道致病菌核酸，实现单管多菌联检。各病原扩增体系互不干扰，特异性强、灵敏度高，可快速明确细菌性呼吸道感染的致病菌种类，大幅提升临床检测效率，适用于呼吸道细菌感染的广谱筛查、疑难感染病原鉴别。
产品名称 | 呼吸道细菌多重PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P015051 |
英文名称 | Multiplex PCR Detection Kit for Respiratory Bacteria | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
体系内置多种呼吸道致病菌专属引物，可在单管反应中同时扩增多种细菌靶基因。
依据扩增产物片段长度差异，可同时鉴别多种常见呼吸道致病细菌。
优化引物浓度配比，减少不同引物之间非特异性结合，保障多重扩增稳定性。
操作步骤：
1. 样本处理
提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）
标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。
注意事项：
1、实验分区管理
实验全程需严格划分三个独立区域：试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区，各区实验服、移液器及耗材严禁混用，防止交叉污染。
2、防止污染操作
使用带滤芯枪头，每步更换枪头；
阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；
加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。
3、试剂保存与使用
所有试剂需-20℃避光保存，避免反复冻融，确保稳定性；
使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。
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