本试剂盒为普通终点 PCR 检测体系，靶向溶藻弧菌 gyrB 管家基因设计特异性扩增引物，内含 PCR 缓冲液、dNTP 混合物、高保真 TaqDNA 聚合酶、阳性标准模板与阴性对照，仅需纯化样本 DNA 即可开展扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳成像判定结果，专一性区分副溶弧菌、霍乱弧菌等近缘水产致病菌，适配海水养殖水体、生鲜水产品、病鱼组织样本检测，多用于水产病害溯源与食品安全基础科研检测。
产品名称 | 溶藻弧菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P015234 |
英文名称 | Vibrio alginolyticus PCR Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
水产样本经裂解、离心提纯溶藻弧菌基因组 DNA，消除水体杂质干扰。
引物靶向溶藻弧菌毒力保守基因，仅匹配该菌种核酸模板完成扩增。
电泳识别特异性目的条带，出现对应片段证明样本检出溶藻弧菌。
操作步骤：
1. DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备（独立操作区）
标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。
3. PCR反应体系配制（试剂配制区）
按以下比例配制（示例）：
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。
数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
注意事项：
1、实验分区管理
实验全程需严格划分三个独立区域：试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区，各区实验服、移液器及耗材严禁混用，防止交叉污染。
2、防止污染操作
使用带滤芯枪头，每步更换枪头；
阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；
加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。
3、试剂保存与使用
所有试剂需-20℃避光保存，避免反复冻融，确保稳定性；
使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。
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