乳酸杆菌PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒基于乳酸杆菌属 16S rRNA 保守区段设计通用扩增引物，为即开即用型常规 PCR 成套试剂，完整包含扩增所需全部反应组分，无需自行配制基础体系，可对肠道粪便、发酵食品、益生菌制剂、生殖道分泌物样本中的乳酸杆菌属总核酸进行体外扩增鉴定，无乳球菌、双歧杆菌等共生菌群交叉扩增干扰，扩增条带单一清晰，适合肠道微生态、发酵食品菌种鉴定、益生菌含量筛查相关基础分子实验研究。

基础原理：

粪便、发酵食品样本裂解后提取微生物总 DNA，去除食物基质抑制物。

采用乳酸杆菌属特异性 16S rRNA 引物，特异性扩增属内菌种保守核酸片段。

凝胶电泳比对扩增条带分子量，确认样本中存在乳酸杆菌核酸。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。

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