产品名称:禽流感通用型H-H亚型PCR试剂盒
英文名称:Universal Avian Influenza H-H Subtype PCR Kit
货号:YS-P015182
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:
筛选全部 H 亚型血凝素共有保守核酸序列,通用引物可结合所有 H 亚型 HA 基因,RT-PCR 扩增后统一条带判定样本含任意 H 亚型禽流感。
一步法荧光 RT-PCR,靶标为各 H 亚型高度同源 HA 片段,只要存在任一 H 亚型病毒核酸即可触发荧光扩增信号,全覆盖筛查 H 亚型毒株。
消除各 H 亚型基因序列差异干扰,引物结合区域无突变位点,不受毒株变异影响,仅禽流感 H 亚型核酸可发生特异性扩增反应。
实验流程:
1. 样本处理
提取待测样本RNA,建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释(示例:6个梯度)
标记离心管(7至2号),每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照,避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录:50℃ 15分钟(可选,根据病毒RNA特性调整)。
预变性:95℃ 2分钟。
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号),共40循环。
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注意事项:
避免反复冻融试剂,解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途,不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备,避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则,运输时使用干冰或冰袋保存。
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