产品名称：犬瘟热病毒PCR检测试剂盒
英文名称：Canine Distemper Virus PCR Detection Kit
货号：YS-P015186
分类：PCR检测试剂盒
规格：50T/盒
检测原理：
提取犬鼻拭子、肺组织病毒 RNA，反转录后扩增犬瘟热 N 核蛋白基因，普通 PCR 电泳条带筛查病毒感染样本。
多重一步 RT-PCR，同步扩增犬瘟热保守基因，荧光信号实时监测扩增过程，快速区分犬瘟热与犬细小病毒。
靶标选用病毒高度稳定的 L 聚合酶基因，极少发生毒株突变，变异株仍可被引物识别扩增，降低漏检概率。
实验流程：
DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA，确保无抑制剂残留。
标准曲线制备（样本制备区）
标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用带滤芯枪头）。
梯度稀释阳性对照：
7号管：加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品；
依次稀释至2号管，最终浓度跨5个数量级（1×10^7至1×10^3拷贝/μL）。
所有标准品置于冰上备用，避免反复冻融。
试剂配制（试剂准备区）
反应液避光解冻后涡旋混匀，短暂离心分装至PCR管。
每反应体系20 μL，含预混引物、荧光染料及缓冲液。
加样（样本处理区）
分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管，阴性对照以DEPC-H2O替代。
盖紧管盖，避免气泡干扰。
PCR扩增（核酸扩增区）
按以下程序运行定量PCR仪：
预变性：95℃ 2分钟；
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析（可选）。
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注意事项：
分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染
无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服
试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心
避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作
防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台
关键字： 犬瘟热病毒;PCR检测试剂盒;
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