本试剂盒聚焦耶尔森氏菌毒力ail特异性基因，采用常规PCR扩增技术，实现致病性血清型耶尔森氏菌的精准定性检测。试剂盒针对ail基因保守序列设计特异性扩增引物，可精准识别致病性菌株，区分非致病性耶尔森氏菌及其他肠道致病菌，体系稳定性优异、扩增重复性好，操作便捷，适用于食品、水源、畜禽样本及临床样本中致病性耶尔森氏菌的筛查检测，是防控耶尔森氏菌感染及食源性污染的核心检测工具。
产品名称 | 血清型耶尔森氏菌ail基因常规PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P015287 |
英文名称 | Conventional PCR Detection Kit for ail Gene of Serotype Yersinia | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
破碎耶尔森氏菌菌体，提纯基因组 DNA，去除肉汤、粪便等基质干扰物质。
专属引物特异性识别 ail 毒力基因保守区，循环扩增获得特征长度核酸片段。
电泳比对条带分子量，匹配目标片段则确认致病性耶尔森氏菌阳性。
操作步骤：
1. 样本处理
提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）
标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。
注意事项：
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。
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