本试剂盒整合乙肝病毒核酸定量检测与YMDD耐药变异检测双重功能，采用荧光PCR扩增技术，可同步完成样本中乙肝病毒核酸载量定量检测及拉米夫定相关YMDD位点变异筛查。试剂盒兼具定量精准度与变异检测特异性，一次反应可获取病毒载量与耐药突变双重数据，高效便捷、灵敏度高、重复性好，适用于乙肝患者病毒复制水平监测、抗病毒疗效评估、耐药变异早期筛查及临床动态诊疗监测。
产品名称 | 乙型肝炎病毒核酸定量及YMDD变异联合PCR测定试剂盒 | 货号 | YS-P015298 |
英文名称 | Combined PCR Assay Kit for HBV Nucleic Acid Quantification and YMDD Mutation Detection | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
提取血清 HBV 核酸，利用荧光探针同步扩增病毒保守基因与 YMDD 突变区段。
扩增过程中荧光信号实时累积，依据信号强度实现病毒载量定量检测。
扩增产物靶向 YMDD 位点，通过序列差异区分野生株与耐药突变毒株。
操作步骤：
1. 样本处理
提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）
标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。
注意事项：
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。
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