产品名称:人线粒体DNA PCR检测试剂盒
英文名称:Human Mitochondrial DNA PCR Detection Kit
货号:YS-P015222
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:
提取人体细胞总 DNA,线粒体 mtDNA 特异性引物扩增 D-loop 控制区,电泳检测线粒体基因扩增条带。
荧光定量 PCR 定量线粒体 DNA 拷贝数,评估细胞线粒体损伤、衰老状态核酸指标。
引物仅结合线粒体环状 DNA 保守序列,不与细胞核基因组同源序列非特异性扩增。
实验流程:
样本处理(样本处理区)
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸,避免交叉污染。
试剂配制(试剂准备区)
反应体系(20μL/管):19μL反应液 + 1μL酶液,分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增(核酸扩增区)
循环参数:
预变性:95℃ 2min(1循环);
扩增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循环,60℃时采集荧光信号,FAM通道)。
结果分析
阳性:Ct值≤40,扩增曲线呈指数增长;
阴性:无Ct值或曲线平直;
可疑:40<Ct≤45,需复测确认。
质控要求:阳性质控Ct≤32,阴性质控无扩增。
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注意事项:
所有耗材必须无核酸酶,吸头一次性使用,禁止重复吸取;
阳性模板拷贝浓度高,开盖操作轻柔,避免气溶胶扩散造成全域污染;
试剂融化后冰上放置不超过 2 h,用完立即放回 - 20℃;
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃;
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测,禁止人体临床检测;
移液器、操作台定期紫外消毒,长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
关键字: 人线粒体DNA ;PCR检测试剂盒;
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