本试剂盒基于实时荧光PCR检测技术研发，专为快速、特异性检测样本中的出血性大肠杆菌O:H型（EHEC O）核酸设计，可精准识别该致病菌的特异性基因片段，有效区分其他常见肠道致病菌，无交叉反应。试剂盒配套完整检测体系，操作简便、检测灵敏度高、耗时短，能够精准检出食品、环境样本及临床样本中的EHEC O毒株，可应用于食品安全筛查、公共卫生监测、致病菌溯源及临床辅助诊断等场景，为出血性大肠杆菌感染防控与风险排查提供可靠的分子检测依据。
产品名称 | 出血性大肠杆菌O:H(EHEC O)核酸检测试剂盒 | 货号 | YS-P015496 |
英文名称 | Enterohemorrhagic Escherichia coli O Strain (EHEC O) Nucleic Acid Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
以志贺毒素 stx2 基因、O 型特异性 O 抗原基因双靶标联合扩增，单一靶标阳性仅可疑，双靶同时检出判定致病性出血性大肠杆菌，提升检测准确度。
采用柱提法分离核酸，利用硅胶膜在高盐环境吸附 DNA，洗脱液低盐释放纯核酸，去除肉类样本脂肪、蛋白对扩增的抑制作用。
终点荧光判读模式，扩增完成后读取荧光强度，阈值区分阴阳性，兼容普通 PCR 仪与实时荧光定量 PCR 仪两类设备通用检测。
操作步骤：
样本处理（样本处理区）
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。
试剂配制（试剂准备区）
反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增（核酸扩增区）
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。
结果分析
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；
阴性：无Ct值或曲线平直；
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。
注意事项：
所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰
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关键字： 出血性大肠杆菌O:H;EHEC O;核酸检测试剂盒;
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