产品名称：日本乙型脑炎病毒(JEV)核酸检测试剂盒
英文名称：Japanese Encephalitis Virus (JEV) Nucleic Acid Detection Kit
货号：YS-P015420
分类：核酸检测试剂盒
规格：50T/盒
检测原理：
E 包膜蛋白基因 RT-qPCR 荧光探针法，蚊虫传播的 RNA 病毒，靶向 E 基因扩增，可检测脑组织、流产胎儿样本中乙脑病毒核酸，用于母猪流产病因诊断。
巢式 PCR 两步扩增原理，第一轮广谱引物扩增黄病毒片段，第二轮 JEV 特异性引物二次扩增，大幅提升低病毒载量隐性感染样本检出率。
荧光染料终点法 RT-PCR，扩增完成后加入 SYBR Green 染料，熔解曲线分析 Tm 值区分乙脑病毒与其他黄病毒，避免交叉阳性。
实验流程：
样本处理（样本处理区）
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。
试剂配制（试剂准备区）
反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增（核酸扩增区）
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。
结果分析
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；
阴性：无Ct值或曲线平直；
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。
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注意事项：
所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰
关键字： 日本乙型脑炎病毒;JEV;核酸检测试剂盒;
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