产品名称：牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒
英文名称：Mycobacterium Paratuberculosis (MPB) Nucleic Acid Detection Kit
货号：YS-P015435
分类：核酸检测试剂盒
规格：50T/盒
检测原理：
IS900 特异性插入序列 qPCR，IS900 为副结核杆菌独有多拷贝基因，靶向该序列扩增检测牛副结核病病原。
巢式 PCR 两步扩增原理，针对粪便低载量副结核杆菌，两轮扩增富集靶 DNA，提升慢性感染牛检出率。
固相核酸杂交显色，扩增产物与 IS900 探针膜杂交显色，适配大规模牧场粪便筛查。
实验流程：
样本处理（样本处理区）
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。
试剂配制（试剂准备区）
反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增（核酸扩增区）
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。
结果分析
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；
阴性：无Ct值或曲线平直；
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。
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注意事项：
所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；
阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；
试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；
移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
关键字： 牛副结核分歧杆菌;MPB;核酸检测试剂;
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