本试剂盒针对禽流感病毒两种重点H亚型毒株设计双重检测体系，可精准鉴别并检测对应亚型禽流感病毒核酸，特异性区分不同亚型毒株，规避亚型交叉干扰。检测灵敏度高，可检出微量病毒核酸，适用于禽类临床疫病诊断、亚型精准分型、疫情溯源及畜禽进出口检疫检测。
产品名称 | 禽流感病毒H/H亚型(AIV-H/H)核酸检测试剂盒 | 货号 | YS-P015621 |
英文名称 | Avian Influenza Virus H/H Subtype (AIV-H/H) Nucleic Acid Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
针对两种禽流感H亚型各自特异性血凝素基因序列设计专属引物探针，通过双重荧光PCR同步扩增，实现两种H亚型的精准分型检测。
基于不同H亚型禽流感病毒的基因序列差异性，探针特异性匹配对应亚型靶标，无交叉扩增，可精准区分两种亚型毒株感染。
纯化样本病毒核酸后，通过双重PCR体系分别富集两种亚型病毒核酸，结合双通道荧光信号分析，快速完成亚型分型鉴别。
操作步骤：
DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA，确保无抑制剂残留。
标准曲线制备（样本制备区）
标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用带滤芯枪头）。
梯度稀释阳性对照：
7号管：加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品；
依次稀释至2号管，最终浓度跨5个数量级（1×10^7至1×10^3拷贝/μL）。
所有标准品置于冰上备用，避免反复冻融。
试剂配制（试剂准备区）
反应液避光解冻后涡旋混匀，短暂离心分装至PCR管。
每反应体系20 μL，含预混引物、荧光染料及缓冲液。
加样（样本处理区）
分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管，阴性对照以DEPC-H2O替代。
盖紧管盖，避免气泡干扰。
PCR扩增（核酸扩增区）
按以下程序运行定量PCR仪：
预变性：95℃ 2分钟；
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析（可选）。
注意事项：
分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染
无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服
试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心
避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作
防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台
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关键字： 禽流感病毒H/H亚型;AIV-H/H; 核酸检测试剂盒;
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