本试剂盒专为猪蓝耳病毒分型检测设计，可同步检测猪蓝耳病毒经典型毒株与高致病性毒株核酸，精准区分两种主流致病亚型。猪蓝耳病不同亚型毒株致病力、发病症状存在明显差异，本产品针对性解决了临床难以快速分型鉴别诊断的难题，适用于猪场疑似病例确诊、区域疫病流行病学调查、引种检疫及猪场常态化疫病监测。试剂盒检测速度快、重复性好，可有效检出隐性感染、早期感染样本中的病毒核酸，帮助养殖及防疫人员快速判定感染毒株类型，精准制定针对性免疫与治疗方案，降低蓝耳病变异传播及大面积发病风险。
产品名称 | 猪蓝耳病毒经典型/高致病性（PRRSV-C/PRRSV-M）双重核酸检测试剂盒 | 货号 | YS-P015638 |
英文名称 | Classical Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus / Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (PRRSV-C/PRRSV-M) Duplex Nucleic Acid Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
双重荧光定量 PCR 扩增原理，分别靶向经典株 ORF5 保守序列、高致病性株缺失突变特征区域设计两组互不干扰的引物探针，两种探针修饰不同荧光报告基团，扩增时释放独立荧光，区分两类毒株。
核酸提取采用磁珠吸附法配套裂解缓冲液，快速裂解细胞释放病毒 RNA，磁珠特异性结合核酸杂质分离，去除血红蛋白、组织蛋白等 PCR 抑制物，提升检测灵敏度。
设置阳性对照、阴性对照与临界阳性质控品，阳性对照含两种毒株体外转录 RNA，用于验证试剂盒扩增体系有效性；临界质控品划定检出阈值，实现定量定性同步判定。
操作步骤：
1. 样本处理
提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）
标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。
注意事项：
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。
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关键字： 猪蓝耳病毒经典型/高致病性;PRRSV-C/PRRSV-M;核酸检测试剂盒;
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