质量控制
除琥珀碱型 Ti 质粒 pEHA105 和 pSoup 质粒外，无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分
钟（或干冰乙醇浴和-80℃冰冻）、37 ℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟；
3.加入 900 μl 无抗生素的 YEB 液体培养基，于 28 ℃振荡培养 2~3 小时；
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28 ℃培养箱培养 2-3 天（当平板只含有 50 μg/ml Kan 时，28 ℃培养 48 h 即可；平板中同
时加入 50 μg/ml Kan，20 μg/ml Rif 时，需 28 ℃培养 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 则需要 28℃
培养 72-90 h）。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 利福平浓度不应高于 25 μg/μl，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率；
4.因为 Ti 质粒丢失的概率极低（可以忽略）， 一般培养农杆菌时不考虑添加相应抗生素。