基于间接竞争ELISA原理,将重组的人COTL1包被于微孔板上,形成固相抗原。实验时,样本中的COTL1与微孔板上的固相抗原竞争结合生物素化的抗COTL1抗体,随后加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物,通过酶催化底物显色。样本中COTL1浓度越高,结合在固相上的生物素化抗体越少,颜色越浅。通过与标准曲线比较,可计算出样本中COTL1的含量。
产品名称 | 人毛状样蛋白1(COTL1)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | human COTL1 elisa kit | 货号 | PH26106 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:90-110min
保存条件:2-8℃冷藏储存
特异性:特异性识别人 COTL1 蛋白
板内变异系数:≤8%
样本处理与保存方法:
不同样本的处理方式有所差异,处理后需确保样本清澈无沉淀,避免溶血或高血脂样本影响结果:
血清样本
全血标本室温放置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟,取上清液检测
短期保存(1周内)可置于4℃,长期保存需分装后-20℃/-80℃冻存,避免反复冻融
血浆样本
选择EDTA或肝素作为抗凝剂,采血后30分钟内于2-8℃环境1000×g离心15分钟,取上清液
保存条件同血清样本
组织匀浆样本
用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后剪碎
按1:9的重量体积比加入PBS(如1g组织加9mL PBS,可添加蛋白酶抑制剂),冰上充分研磨或超声破碎
5000×g离心5-10分钟,取上清液检测;未使用的样本分装后冻存
细胞培养上清样本
1000×g离心20分钟,去除细胞碎片及杂质,取上清液检测
若检测细胞内成分,需用PBS稀释细胞悬液至浓度约100万/mL,反复冻融裂解细胞后离心取上清
尿液样本
无菌管收集尿液,2000-3000转/分离心20分钟,取上清液检测;若有沉淀需再次离心
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